番茄2014.doc
GB 中华人民共和国农业部 发布 --实施 施 --发布 植物新品种特异性、一致性和稳定性 测试指南 番茄 Guidelines for the conduct of tests for distinctness, uniity and stability Tomato Lycopersicon esculentum Mill (UPOVTG/44/10,Guidelines for the conduct of tests for distinctness, uniity and stability Tomato,NEQ) NY/T 201 中华人民共和国农业行业标准 ICS 65.020.20 B 05 NY/T 201 目 次 前言II 1 范围1 2 规范性引用文件1 3 术语和定义1 4 符号1 5 繁殖材料的要求2 6 测试方法2 7 特异性、一致性和稳定性结果的判定2 8 性状表3 9 分组性状3 10 技术问卷3 附录A(规范性附录)番茄性状表4 附录B(规范性附录)番茄性状表的解释11 附录C(规范性附录)番茄技术问卷格式18 I 前 言 本标准依据GB/T 1.12009给出的规则起草。 本标准使用重新起草法修改采用了国际植物新品种保护联盟UPOV指南“TG/44/10,Guidelines for the conduct of tests for distinctness,uniity and stabilityTomato”。 本标准对应于UPOV指南TG/44/10,本标准与TG/44/10的一致性程度为非等效。 本标准与UPOV指南TG/44/10相比存在技术性差异,主要差异如下 增加了“植株主茎第一花序着生节位数”、“仅适用于有限生长型品种植株高度”、“植株生长习性”、“果实果梗洼处木栓化大小”、“果实果皮颜色”、“胎座胶状物颜色”共6个性状; 删除了“叶光泽度”、“叶泡状程度”、“叶泡大小”、“花柱头绒毛”共4个性状; 调整了“果实大小”、“果实纵径/横径比率”、“果实纵切面形状”、“果实棱沟”、“果梗洼大小”、“果实横切面果心的大小”、“果实心室数”、“果实绿肩”、“果实绿肩覆盖范围”、“果实绿肩绿色程度”、“果实成熟前果面绿色程度”、“果实成熟时颜色”、“果实果肉颜色”、“成熟期”共14个性状的表达状态;将“仅适用于有限生长型品种植株主茎花序数”;“茎上部1/3处花青甙显色强度”;“果实果梗洼凹陷程度”;“果实货架寿命”;“果实干物质含量”;“银敏感度”;“抗性南方根结线虫病”;“抗性黄萎病”;“抗性枯萎病”;“抗性叶霉病”;“抗性番茄花叶病毒”;“抗性晚疫病”共12个性状调整到选测性状表。 本标准由中华人民共和国农业部科技教育司提出。 本标准由全国植物新品种测试标准化技术委员会SAC/TC 277归口。 本指南起草单位中国农业科学院蔬菜花卉研究所、上海市农业科学院、农业部科技发展中心。 本指南主要起草人杜永臣、陈海荣、杨坤、高建昌、黄志城、高振华、冯兰香、吕波、王孝宣。 II 21 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 番茄 1 范围 本指南规定了番茄(Lycopersicon esculantum Mill)新品种特异性、一致性和稳定性测试的技术要求和结果判定的一般原则。 本指南适用于番茄新品种特异性、一致性和稳定性测试和结果判定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本包括所有的修改单适用于本文件。 GB/T 19557.1 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 总则 3 术语和定义 GB/T 19557.1 界定的以及下列术语和定义适用于本标准。 3.1 群体测量 single measurement of a group of plants or parts of plants 对一批植株或植株的某器官或部位进行测量,获得一个群体记录。 3.2 个体测量 measurement of a number of individual plants or parts of plants 对一批植株或植株的某器官或部位进行逐个测量,获得一组个体记录。 3.3 群体目测 visual assessment by a single observation of a group of plants or parts of plants 对一批植株或植株的某器官或部位进行目测,获得一个群体记录。 3.4 个体目测 visual assessment by observation of individual plants or parts of plants 对一批植株或植株的某器官或部位进行逐个目测,获得一组个体记录。 4 符号 下列符号适用于本文件 MG群体测量。 MS个体测量。 VG群体目测。 VS个体目测。 QL质量性状。 QN数量性状。 PQ假质量性状。 *标注性状为UPOV用于统一品种描述所需要的重要性状,除非受环境条件限制性状的表达状态无法测试,所有UPOV成员都应使用这些性状。 a、b标注内容在B.2中进行了详细解释。 标注内容在B.3中进行了详细解释。 __本文件中下划线是特别提示测试性状的适用范围。 5 繁殖材料的要求 5.1 繁殖材料以种子形式提供。 5.2 提交的种子数量至少25g。 5.3 提交的种子应外观健康,活力高,无病虫侵害。种子的具体质量要求如下 净度≥98、发芽率≥85、含水量≤8。 5.4 提交的种子一般不进行任何影响品种性状正常表达的处理(如种子包衣处理)。如果已处理,应提供处理的详细说明。 5.5 提交的种子应符合中国植物检疫的有关规定。 6 测试方法 6.1 测试周期 测试周期至少为2个独立的生长周期。 6.2 测试地点 测试通常在一个地点进行。如果某些性状在该地点不能充分表达,可在其他符合条件的地点进行观测。 6.3 田间试验 6.3.1试验设计 申请品种和近似品种相邻种植。 种植方式采用育苗移栽,适宜行株距。保护地栽培每个小区不少于10株,露地栽培每个小区不少于20株,共设2次重复。 6.3.2 田间管理 可按当地大田生产管理方式进行。 植株生长发育过程中应及时整枝打叉,保证正常的生长发育。 6.4 性状观测 6.4.1观测时期 性状观测应按照表A.1和表A.2列出的生育阶段进行。生育阶段描述见表B.1。 6.4.2 观测方法 性状观测应按照表A.1和表A.2规定的观测方法VG、VS、MG、MS进行。部分性状观测方法见B.2和B.3。 6.4.3观测数量 除非另有说明,个体观测性状VS、MS每个小区植株取样数量不少于10个。在观测植株的器官或部位时,每个植株取样数量应为1个。群体观测性状VG、MG应观测整个小区或规定大小的群体。 6.5附加测试 必要时,可选用表A.2中的性状或本文件未列出的性状进行附加测试。 7 特异性、一致性和稳定性结果的判定 7.1 总体原则 特异性、一致性和稳定性的判定按照GB/T 19557.1确定的原则进行。 7.2 特异性的判定 申请品种应明显区别于所有已知品种。在测试中,当申请品种至少在一个性状上与近似品种具有明显且可重现的差异时,即可判定申请品种具备特异性。 7.3 一致性的判定 对于测试品种,一致性判定时,采用1的群体标准和至少95的接受概率。当样本大小为20株35株时,最多可以允许有1个异型株。当样本大小为36株40株时,最多可以允许有2个异型株。 7.4 稳定性的判定 如果一个品种具备一致性,则可认为该品种具备稳定性。一般不对稳定性进行测试。 必要时,可以种植该品种的下一代种子。与以前提供的繁殖材料相比,若性状表达无明显变化,则可判定该品种具备稳定性。 杂交种的稳定性判定,除直接对杂交种本身进行测试外,还可以通过对其亲本系的一致性和稳定性鉴定的方法进行判定。 8 性状表 根据测试需要,性状分为基本性状和选测性状。基本性状是测试中必须使用的性状,基本性状见表A.1,选测性状见表A.2。 8.1 概述 性状表列出了性状名称、表达类型、表达状态及相应的代码和标准品种、观测时期和方法等内容。 8.2 表达类型 根据性状表达方式,性状分为质量性状、假质量性状和数量性状三种类型。 8.3 表达状态和相应代码 8.3.1 每个性状划分为一系列表达状态,以便于定义性状和规范描述;每个表达状态赋予一个相应的数字代码,以便于数据记录、处理和品种描述的建立与交流。 8.3.2 对于质量性状和假质量性状,所有的表达状态都应当在测试指南中列出;对于数量性状,为了缩小性状表的长度,偶数代码的表达状态可以不列出,偶数代码的表达状态可以前一个表达状态到后一个表达状态的形式来描述。 8.4 标准品种 性状表中列出了部分性状有关表达状态可参考的标准品种,以助于确定相关性状的不同表达状态和校正环境因素引起的差异。 9 分组性状 本文件中,品种分组性状如下 a *植株生长类型 表A.1中性状3。 b *复叶类型表A.1中性状10。 c *果实绿肩表A.1中性状17。 d *果梗离层 表A.1中性状21。 e *果实纵切面形状表A.1中性状25。 f *果实心室数量表A.1中性状36。 g *果实成熟时颜色 表A.1中性状37。 10 技术问卷 申请人应按附录C给出的格式填写番茄技术问卷。 规范性附录 番茄性状表 A.1番茄基本性状见表A.1。 表A.1番茄基本性状表 序号 性 状 观测时期和方法 表达状态 标 准 品 种 代 码 1 *幼苗下胚轴花青甙显色 QL 22 VG 无 851-316 1 有 中蔬4号 9 2 植株主茎第一花序着生节位数 QN 312 MS 少 早粉2号, Campbell 1327 1 中 3 多 5 3 *植株生长类型 QL 332 VG 有限 早粉2号, Campbell 1327 1 无限 中蔬4号 2 4 仅适用于有限生长型品种植株高度 QN 434 MS 矮 TinyTim 3 中 早粉2号 5 高 Campbell 1327 7 5 仅适用于无限生长型品种植株高度 QN 434 MS 矮 3 中 5 高 7 6 植株生长习性 PQ 434 VG 直立 齐研矮粉 1 半蔓生 中蔬4号 2 蔓生 秘鲁番茄 3 7 *叶姿态 QN a 434 VG 半直立 3 水平 5 半下垂 7 8 *复叶长度 QN a 434 MS 短 齐研矮粉 3 中 农大23号 5 长 中蔬5号 7 9 *复叶宽度 QN a 434 MS 窄 MAO-1 3 中 851-316 5 宽 中蔬5号 7 10 *复叶类型 QL a 434 VG 羽状复叶 齐研矮粉 1 二回羽状复叶 美味樱桃 2 表A.1(续) 序号 性 状 观测时期和方法 表达状态 标 准 品 种 代 码 11 复叶小叶大小 QN a 434 VG 小 3 中 5 大 7 12 叶绿色程度 QN a 434 VG 浅 橘黄嘉辰 3 中 中蔬4号 5 深 美味樱桃 7 13 叶小叶叶柄相对于主轴的姿态 QN a 434 VG 半直立 P98-500 3 水平 中蔬4号 5 半下垂 黄珍珠 7 14 *花花序类型 PQ 422 VG 单式花序为主 中蔬4号 1 中间型 美味樱桃 2 多歧花序为主 ぺぺ 3 15 花簇生 QL 322 VG 无 强丰 1 9 有 宁农1号, Marmande 16 *花颜色 PQ 322 VG 黄绿色 绿宝石 1 黄色 中蔬4号 2 橙色 秘鲁番茄 3 17 *果实绿肩 QL 422 VG 无 851-316 1 有 中蔬4号 9 18 *果实绿肩覆盖范围 QN 422 VG 小 橘黄嘉辰 3 中 中蔬4号 5 大 FMTT271 7 19 *果实绿肩绿色程度 QN 422 VG 浅 橘黄嘉辰 3 5 中 中蔬4号 深 FMTT271 7 20 *果实成熟前果面绿色程度 QN 422 VG 浅 NCX3032 3 中 中蔬4号 5 深 7 21 *果梗离层 QL b 424 VG 无 NCX3032 1 有 中蔬4号 9 表A.1(续) 序号 性 状 观测时期和方法 表达状态 标 准 品 种 代 码 22 *仅适用于有离层品种果柄长度 QN b 424 MS 短 美味樱桃, Campbell 1327 3 中 中蔬5号 5 长 FMTT271, NCX3032 7 23 *果实重量 QN b 424 MS 极小 秘鲁 1 极小到小 美味樱桃 2 小 3 小到中 Roma NCX3032 4 中 农大23号 5 中到大 6 大 中蔬4号 7 大到极大 单花番茄 8 极大 宁农1号 9 24 *果实纵径/横径比率 QN b 424 MS 极小 宁农1号 1 小 中蔬6号 3 中 中蔬4号 5 大 NCX3032 7 极大 长形番茄 9 25 *果实纵切面形状 PQ b 424 VG 扁平形 1 扁圆形 2 圆形 3 长方形 4 圆柱形 5 椭圆形 6 心形 7 倒卵圆形 8 卵圆形 9 梨形 10 26 *果实果梗端的棱 QN b 424 VG 无或极弱 NCX3032 1 弱 中蔬4号 3 中 pennred 5 强 MarmandeD22 7 极强 宁农1号 9 27 果实横切面形状 PQ b 424 VG 不圆 宁农1号 1 圆 中蔬4号 2 表A.1(续) 序号 性 状 观测时期和方法 表达状态 标 准 品 种 代 码 28 果实果梗洼大小 QN b 424 MS 极小 红梨 1 小 Hawaii7998 3 中 早粉2号 5 大 中蔬6号 7 极大 宁农1号 9 29 果实果梗洼处木栓化大小 QN b 424 MS 极小 1 小 3 中 5 大 7 极大 9 30 果实果梗洼凹陷程度 QN b 424 VG 弱 3 中 5 强 7 31 果实果皮颜色 QL b 424 VG 无色 中蔬4号 1 橙黄色 中蔬6号 2 32 果实果脐大小 QN b 424 VG 小 1 中 2 大 3 33 果实脐端形状 QN b 424 VG 凹 宁农1号 1 凹到平 Marmande 2 平 中蔬4号 3 平到凸 NCX3032 4 凸 长形番茄 5 34 果实横切面果心大小 QN b 424 VG 极小 红梨 1 小 Hawaii7998 3 中 早粉2号 5 大 中蔬6号 7 极大 宁农1号 9 35 果实果肉厚度 QN b 424 MS 薄 美味樱桃 3 中 中蔬4号 5 厚 Ferline 7 36 *果实心室数量 QN b 424 VS 仅2个 1 2或3个 2 3或4个 3 4或5或6个 4 6个以上 5 表A.1(续) 序号 性 状 观测时期和方法 表达状态 标 准 品 种 代 码 37 *果实成熟时颜色 PQ b 424 VG 奶油色 1 绿色 绿宝石 2 黄色 黄珍珠 3 黄绿色 4 橙色 橘黄嘉辰 5 粉红色 中蔬4号 6 红色 中蔬6号 7 粉紫色 黑珍珠 8 棕紫色 9 多色 10 38 *果实果肉颜色 PQ b 424 VG 奶油色 1 绿色 2 黄色 黄珍珠 3 橙色 橘黄嘉辰 4 粉红色 中蔬4号 5 红色 Ferline 6 浅棕色 7 39 胎座胶状物颜色 PQ b 424 VG 黄色 橘黄嘉辰 1 黄绿色 毛粉802 2 绿色 秘鲁 3 粉红色 中蔬4号 4 40 果实硬度 QN b 424 VG 软 3 中 5 硬 7 41 开花期 QN 312 MG 极早 1 早 美味樱桃 3 中 丽春 5 晚 橘黄嘉辰 7 极晚 9 42 *成熟期 QN 414 MG 极早 1 早 美味樱桃 3 中 中蔬4号 5 晚 橘黄嘉辰 7 极晚 9 A.2番茄选测性状见表A.2。 表A.2番茄选测性状表 序号 性 状 观测时期和方法 表达状态 标 准 品 种 代 码 43 仅适用于有限生长品种植株主茎花序数量 QN MS 少 3 中 5 多 7 44 茎花青甙显色强度 QN 322 VG 无或极弱 1 弱 3 中 5 强 7 极强 9 45 果实货架寿命 QN MG 极短 1 短 3 中 5 长 7 极长 9 46 果实干物质含量 QN MG 低 黄珍珠 3 中 中蔬4号 5 高 Ferline 7 47 银敏感度 QL MG 不敏感 1 敏感 9 48 抗性斑枯病 QL MG 感 早粉2号 1 抗 秘鲁番茄 9 49 抗性南方根结线虫 QL MG 感 早粉2号 1 抗 Anahu 9 50 抗性黄萎病 QL MG 感 丽春 1 抗 温室桃太郎 9 51 抗性枯萎病 QL MG 感 1 抗 9 52 抗性叶霉病 QL MG 感 1 抗 9 53 抗性黄瓜花叶病毒 QL MG 感 早粉2号 1 抗 美味樱桃 9 表A.2(续) 序号 性 状 观测时期和方法 表达状态 标 准 品 种 代 码 54 抗性番茄花叶病毒 QL MG 感 1 抗 9 55 抗性晚疫病 QL MG 感 早粉2号 1 抗 L3708 9 56 抗性黑霉病 QL MG 感 早粉2号 1 抗 L733 9 57 抗性灰叶斑病 QL MG 感 早粉2号 1 抗 Fla.MH-1 VC82-L 9 58 抗性细菌性斑点病(疮痂病) QL MG 感 早粉2号 1 抗 Hawaii7998 9 59 抗性青枯病 QL MG 感 1 抗 9 60 抗性早疫病 QL MG 感 早粉2号 1 抗 Floradel 9 61 抗性黄花曲叶病毒 QL MG 感 1 抗 9 附 录 B 资料性附录 番茄性状表的解释 B.1 番茄生育阶段 见表B.1。 表B.1 番茄生育阶段表 代码 描述 22 展开4片真叶(拉大十字) 312 盛花期(70植株第一花序2朵以上开花) 322 盛花期(70植株第二花序2朵以上开花) 332 盛花期(70植株第三花序2朵以上开花) 414 第一穗果成熟期 422 第二穗果白熟期 424 第二穗果成熟期 425 第二穗果完熟期 434 第三穗果成熟期 444 第四穗果成熟期 B.2 涉及多个性状的解释 a 植株中部1/3处的正常成熟叶。有限生长类型的植株在花、叶封顶时观测;无限生长类型的植株在第五果穗坐果时观测。 b 第二或第三果穗的完全成熟果。 B.3 涉及单个性状的解释 性状5 仅适用于无限生长型品种植株高度,从地面至第四果穗的高度。 性状10 复叶类型,见图B.1。 羽状复叶 二回羽状复叶 2 图B.1 复叶类型 性状11 复叶小叶大小,图 B.1 “二回羽状复叶”中箭头标注位置的小叶。 性状13 叶小叶叶柄相对于主轴的姿态,见图B.2。 半直立 水平 半下垂 3 5 7 图B.2 叶小叶叶柄相对于主轴的姿态 性状14 花花序类型,在第二、第三果穗座果后观测。 性状15 花簇生,在第二或第三花序开花时,观测花序的第一花。 性状16 花颜色,在第二或第三花序的花完全开放时观测。 性状21 果梗离层,见图B.3。 无 有 1 9 图B.3 果梗离层 性状22 仅适用于有离层品种果柄长度,见图B.4。 图B.4 仅适用于有离层品种果柄长度 性状25 果实纵切面形状,见图B.5。 扁平形 扁圆形 圆形 1 2 3 长方形 圆柱形 椭圆形 心形 4 5 6 7 倒卵圆形 卵圆形 梨形 8 9 10 图B.5 果实纵切面形状 性状30 果实果梗洼凹陷程度,见图B.6。 无或极弱 弱 中 强 1 3 5 7 图B.6 果实果梗洼凹陷程度 性状33 果实脐端形状,见图B.7。 凹 凹到平 平 平到凸 凸 1 2 3 4 5 图B.7 果实脐端形状 性状40 果实硬度。 收获时期果实完全着色时采收。 测试方法对照标准品种用手感进行测试评价。 性状41 开花期,统计整个小区30植株的第一花序的第1朵3朵花开放的时间,对照标准品种进行观测。 性状42 成熟期,统计整个小区50植株至少有一个果穗有可采收成熟果的时间,对照标准品种进行观测。 性状44 茎花青甙显色强度,植株上部1/3处。 性状48 抗性斑枯病。 材料准备设“秘鲁番茄”为抗病对照,“早粉2号”番茄为感病对照。各测试品种用50℃温水浸种30min,然后用清水冲洗干净,置于28℃恒温培养箱中催芽,每天用清水淋洗1次2次,出芽后播种于育苗筐内,育苗基质为草炭和蛭石(11),基质经高温蒸汽灭菌。在日光温室育苗,室内温度20℃28℃。每份测试品种重复3次,每一重复10株苗。保存的菌种分别在PDA培养基平板上培养,温度25℃,约8d15d后,培养基表面长出酶层,用灭菌无离子水配制成106个孢子mL-1的接种液,立即用于接种。 接种方法当幼苗长至5片6片真叶时,用微喷雾器将接种液均匀喷雾到每一叶片的表面,直到滴落为止。接种后,将植株放在25℃、无光照、RH100的生长室培养48h,以后RH调为96以上,每天光照14h,强度为70μEm-2s-1。 病情调查与分级标准接种后10d14d调查。 性状49 抗性南方根结线虫病。 材料准备设“Anahu”番茄为抗病对照,“早粉2号”番茄为感病对照。各测试品种用50℃温水浸种30min,然后用清水冲洗干净,置于28℃恒温培养箱中催芽,每天用清水淋洗1次2次,出芽后播种于育苗筐内,育苗基质为草炭和蛭石(11),基质经高温蒸汽灭菌。在日光温室里育苗,室内温度20℃30℃。每份测试品种重复3次,每一重复10株苗。接种病源采用我国番茄线虫病的主要种类南方根结线虫,该线虫在种植“早粉2号”番茄的土壤中保存与繁殖。接种前先将“早粉2号”番茄病根清洗后切碎,放入大型三角瓶中,加入适量的漂白水(NaOCl,有效成分0.5),充分振荡2 min 4 min,洗下卵,迅速以200目及500目细筛过滤(200目在上层),洗下的卵再立即用自来水清洗干净,最后用蒸馏水稀释成浓度为1000卵mL-1作为接种源,立即接种。 接种方法当供试番茄幼苗1叶2叶时,在每个育苗钵底部先放入少量基质,再注入2mL接种源,然后移栽供试番茄幼苗。1钵1苗,置于20℃25℃的温室内或生长箱内培养。 病情调查与分级标准 接种后6周7周调查番茄根部根结和卵块数。 性状50 抗性黄萎病。 材料准备设“温室桃太郎”番茄为抗病对照,“丽春”番茄为感病对照。各测试品种经1gL-1升汞溶液消毒浸种10min后,用清水冲洗,放入湿纱布包中,然后置于恒温培养箱中28℃催芽,每天用清水淋洗1次2次,出芽后播种于育苗筐内,育苗基质为草炭和蛭石(12),在日光温室里育苗,室内温度20℃30℃,幼苗2片真叶时,移入格式塑料育苗盘中,再将该盘放入盛有草炭和蛭石(体积比11)的普通塑料育苗盘中,基质均经高温蒸汽灭菌。每份测试品种重复3次,每一重复10株苗。茄子黄萎病菌经PDA培养基平板培养7d后,挑取其菌丝,接种于PL培养液中,在摇床以120r/min培养7d,培养液经双层纱布过滤,滤液以4000r/min离心10min,留取上清液,用灭菌蒸馏水配制成107个孢子mL-1的接种液,立即用于接种。 接种方法当格式塑料育苗盘中的幼苗长至4片真叶、根部长出底部的孔洞时,将格式塑料育苗盘轻轻提起(以伤根),放入盛有接种液的白瓷盘等容器中15 min,再将此盘放回原塑料育苗盘中。置于白天25℃28℃、晚间20℃22℃的温室内或生长箱内培养。 病情调查与分级标准 接种后4周调查记载。 性状51 抗性枯萎病。 材料准备设“强丰”、“Walter(瓦尔特)”番茄为抗病对照,“丽春”番茄为感病对照。各测试品种经1gL-1升汞溶液消毒浸种10min后,用清水冲洗,放入湿纱布包中,然后置于恒温培养箱中28℃催芽,每天用清水淋洗1次2次,出芽后播种于育苗筐内,育苗基质为草炭和蛭石(11),基质经高温蒸汽灭菌,在日光温室里育苗,室内温度20℃30℃。每份测试品种重复3次,每一重复10株苗。接种菌原为我国的番茄枯萎病的主流生理小种,即1号小种,在PDA培养基平板上培养,温度24℃26℃,每天12h光照、12h黑暗。约一周后,培养基表面长满孢子层,即大型分生孢子,用灭菌蒸馏水配制成106个孢子mL-1的接种液,立即用于接种。 接种方法当幼苗长至1片2片真叶时,将苗拔起,用水将根系冲洗干净,剪去1/3根的长度,在接种液中浸泡2min,然后移入小塑料钵中,置于室温25℃30℃、土温25℃28℃的温室内或生长箱内培养。 病情调查与分级标准 接种后10d左右调查记载。 性状52 抗性叶霉病 材料准备分别设Cf1,2,3,4,5,7,9番茄为抗病对照,“cf0”、“丽春”、“Money maker”番茄为感病对照。各测试品种经1gL-1升汞溶液消毒浸种10min后,用清水冲洗,放入湿纱布包中,然后置于恒温培养箱中28℃催芽,每天用清水淋洗1次2次,出芽后播种于育苗筐内,育苗基质为草炭和蛭石(11),基质经高温蒸汽灭菌,在日光温室里育苗,室内温度20℃30℃。每份测试品种重复3次,每一重复10株苗。接种菌原为我国的番茄叶霉病的两个主流生理小种,即1.2.3号小种和1.2.3.4号小种,分别在PDA培养基平板上培养,温度24℃,约8d15d后,培养基表面长出霉层,用灭菌无离子水配制成106个孢子mL-1的接种液,立即用于接种。 接种方法当幼苗长至3片4片真叶时,用灭菌毛笔蘸取接种液涂抹或喷于真叶背面,然后置于室温22℃25℃、RH100%、光照5000 lx的生长箱内培养。 病情调查与分级标准 接种后12d左右调查记载。 性状53 抗性黄瓜花叶病毒。 材料准备设“美味樱桃”番茄为抗病对照,“早粉2号”番茄为感病对照。各测试品种经1gL-1升汞溶液消毒浸种10min后,用清水冲洗,放入湿纱布包中,然后置于恒温培养箱中28℃催芽,每天用清水淋洗1次2次,出芽后播种于育苗筐内,育苗基质为草炭和蛭石(11,),基质经高温蒸汽灭菌,在日光温室里育苗,室内温度20℃30℃。每份测试品种重复3次,每一重复10株苗。接种毒原为危害我国番茄的黄瓜花叶病毒主流株系,即CMV-重花叶株系,在心叶烟上繁殖,温度20℃28℃,自然光照,约9d11d后,采摘发病叶片,加入5倍于鲜病叶重量的0.01molL-1磷酸缓冲液(pH7.0),捣碎后双层纱布过滤,滤液立即用于接种。 接种方法当幼苗长至2片3片真叶时,叶面撒布一薄层600目的金钢砂,用喷枪或人工摩擦接种。喷枪接种的接种压为2.1 kgcm22.5kgcm2,喷枪嘴距叶片表面2 cm 3 cm。接种2次,间隔2d3d。后置于室温22℃28℃、自然光照的温室内培养。 病情调查与分级标准 接种后14d18d调查记载。 性状54 抗性番茄花叶病毒。 材料准备设“强丰”、“GCR237等系统”番茄为抗病对照,“丽春”、“GCR26”番茄为感病对照。各测试品种经1gL1升汞溶液消毒浸种10min后,用清水冲洗,放入湿纱布包中,然后置于恒温培养箱中28℃催芽,每天用清水淋洗1次2次,出芽后播种于育苗筐内,育苗基质为草炭和蛭石(1﹕1),基质经高温蒸汽灭菌,在日光温室里育苗,室内温度20℃30℃。每份测试品种重复3次,每一重复10株苗。接种毒原为我国的番茄花叶病毒的两个主流株系-ToMV 0株系和ToMV 1株系,均在普通烟“白烟”上繁殖,温度20℃30℃,自然光照,约10d14d后采摘发病叶片,加入10倍于鲜病叶重量的0.01molL-1磷酸缓冲液(pH7.0),捣碎后双层纱布过滤,滤液立即用于接种。 接种方法当幼苗长至2片3片真叶时,叶面撒布一薄层600目的金钢砂,用喷枪或人工摩擦接种。喷枪接种的接种压为2.1 kgcm22.5kgcm2,喷枪嘴距叶片表面2 cm 3 cm。接种2次,间隔2d3d。后置于室温20℃30℃、自然光照的温室内培养。 病情调查与分级标准 接种后14d18d调查记载。 性状55 抗性晚疫病。 材料准备设“L3708”番茄为抗病对照,“早粉2号”番茄为感病对照。各测试品种经1gL-1升汞溶液消毒浸种10min后,用清水冲洗,放入湿纱布包中,然后置于恒温培养箱中28℃催芽,每天用清水淋洗1次2次,出芽后播种于育苗筐内,育苗基质为草炭和蛭石(11),基质经高温蒸汽灭菌,在日光温室里育苗,室内温度20℃30℃。每份测试品种重复4次,每一重复6株8株苗。保存的番茄晚叶霉病菌(当地或全国的优势生理小种)在黑麦琼脂培养基平板上繁殖约14d,20℃、黑暗培养,然后用灭菌无离子水配制成5104个孢子囊mL-1悬浮液,置12℃下2h,让其释放出游动孢子,立即用于接种。 接种方法当幼苗长至7片8片真叶时,用微喷雾器将接种液均匀喷雾到每一叶片的表面和茎部,直到滴落为止。接种后,将植株放在18℃22℃,无光照且RH100%的生长室培养24h ,以后RH调为6095,每天光照14h,强度为70μEm-2s-1。 病情调查与分级标准 接种后第7d和第10d调查记载。 性状56 抗性黑霉病。 材料准备设“L733”番茄为抗病对照,“早粉2号”番茄为感病对照。各测试品种用50℃温水浸种30min,然后用清水冲洗干净,置于28℃恒温培养箱中催芽,每天用清水淋洗1次2次,出芽后播种于育苗筐内,育苗基质为草炭和蛭石(11),基质经高温蒸汽灭菌。在日光温室里育苗,室内温度20℃30℃。每份测试品种重复3次,每一重复10株苗。保存的菌种在TOA培养基(番茄叶、燕麦片和琼脂培养基)平板上培养,温度28℃,每天光照12h,7d10d产孢后,用灭菌无离子水配制成104个孢子mL-1的接种液,立即用于接种。 接种方法当幼苗长至5片6片真叶时,用微喷雾器将接种液均匀喷雾到每一叶片的表面和茎部,直到滴落为止。接种后,将植株放在26℃30℃、无光照、RH100%的生长室培养24h ,以后RH调为96%以上,每天光照14h,强度为70μEm-2s-1。 病情调查与分级标准 接种后14d左右调查记载。 性状57 抗性灰叶斑病。 材料准备设“Fla.MH-1”或“VC82-L”番茄为抗病对照,“早粉2号”番茄为感病对照。各测试品种用50℃温水浸种30min,然后用清水冲洗干净,置于28℃恒温培养箱中催芽,每天用清水淋洗1次2次,出芽后播种于育苗筐内,育苗基质为草炭和蛭石(11),基质经高温蒸汽灭菌。在日光温室里育苗,室内温度20℃30℃。每份测试品种重复3次,每一重复10株苗。保存的菌种在分别在PDA培养基平板上培养,温度26℃,约8d15d后,培养基表面长出霉层,用灭菌无离子水配制成106个孢子mL-1的接种液,立即用于接种。 接种方法当幼苗长至5片6片真叶时,用微喷雾器将接种液均匀喷雾到每一叶片的表面和茎部,直到滴落为止。接种后,将植株放在24℃26℃、无光照、RH100%的生长室培养24h ,以后RH调为96%以上,每天光照14h,强度为70μEm-2s-1。 病情调查与分级标准 接种后14d左右调查记载。