牛心甘蓝蜡粉缺失突变体410M特征的研究.pdf

南 京 农 业 大 学 学 报 ２０１８，４１１５７－６３ ｈｔｔｐ//ｎａｕｘｂ.ｎｊａｕ.ｅｄｕ.ｃｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ＤＯＩ１０.７６８５/ｊｎａｕ.２０１７０５００１ ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������ 收 稿 日 期２０１７－０５－０２ 基 金 项 目 国 家 重 点 研 发 计 划 项 目２０１７ＹＦＤ０１０１８０４ 作 者 简 介 石 利 朝， 硕 士 研 究 生。 ∗ 通 信 作 者 严 继 勇， 研 究 员， 主 要 从 事 甘 蓝 类 蔬 菜 遗 传 育 种 与 种 质 创 新 研 究，Ｅ-ｍａｉｌｙｊｙｑｙ＠１２６.ｃｏｍ。 石 利 朝， 曾 爱 松， 李 家 仪， 等. 牛 心 甘 蓝 蜡 粉 缺 失 突 变 体４１０Ｍ 特 征 的 研 究[Ｊ]. 南 京 农 业 大 学 学 报，２０１８，４１１５７－６３. 牛 心 甘 蓝 蜡 粉 缺 失 突 变 体４１０Ｍ 特 征 的 研 究 石 利 朝 １，２ ， 曾 爱 松 ２ ， 李 家 仪 ３ ， 王 金 香 １，２ ， 宋 立 晓 ２ ， 严 继 勇 ２∗ １. 南 京 农 业 大 学 园 艺 学 院， 江 苏 南 京２１００９５；２. 江 苏 省 农 业 科 学 院 蔬 菜 研 究 所/ 江 苏 省 高 效 园 艺 作 物 遗 传 改 良 重 点 实 验 室， 江 苏 南 京２１００１４；３. 中 国 农 业 大 学 生 物 学 院， 北 京１０００８３ 摘 要[ 目 的] 本 文 旨 在 探 索 牛 心 甘 蓝 蜡 粉 缺 失 突 变 体４１０Ｍ 的 特 征 和 实 际 应 用 价 值， 以 丰 富 甘 蓝 种 质 资 源， 加 速 新 品 种 创 制 和 改 良。 [ 方 法] 调 查 牛 心 甘 蓝 野 生 型 材 料４１０Ｗ 和 蜡 粉 缺 失 突 变 体４１０Ｍ 的 农 艺 性 状， 测 定 其 营 养 品 质； 扫 描 电 镜 观 察 其 叶 表 超 微 结 构； 以 蜡 粉 缺 失 突 变 体 材 料４１０ＭＰ １ 与 其 野 生 型４１０ＷＰ ２ 为 亲 本 分 别 配 制６ 世 代 群 体， 分 析４１０Ｍ 蜡 粉 缺 失 性 状 的 遗 传 规 律； 筛 选 出１４ 个 在 拟 南 芥 中 参 与 蜡 粉 合 成、 转 运 的 基 因， 并 利 用 实 时 荧 光 定 量ＰＣＲ 对 其 在４１０Ｗ 和４１０Ｍ 中 的 表 达 模 式 进 行 分 析。 [ 结 果] 蜡 粉 缺 失 甘 蓝 叶 色 亮 绿， 突 变 体４１０Ｍ 球 叶 和 外 叶 的 维 生 素Ｃ 含 量 显 著 高 于 野 生 型； 其 他 表 型 及 主 要 营 养 成 分 与 野 生 型 无 明 显 差 异。 叶 表 超 微 结 构 观 察 显 示， 突 变 体 叶 表 面 光 滑， 蜡 粉 严 重 缺 失； 野 生 型 叶 表 蜡 粉 分 布 致 密， 晶 体 结 构 主 要 为 片 状 和 线 状。 对６ 世 代 群 体 分 离 比 例 进 行 χ ２ 检 测， 结 果 表 明４１０Ｍ 蜡 粉 缺 失 性 状 为 隐 性 单 基 因 遗 传。 在 参 与 拟 南 芥 蜡 粉 生 物 合 成、 转 运 的１４ 个 基 因 中， 共 有７ 个 基 因 在 野 生 型 中 的 表 达 显 著 高 于 突 变 体。 [ 结 论] 蜡 粉 缺 失 突 变 体４１０Ｍ 遗 传 稳 定， 商 品 性 好， 为 育 种 和 蜡 粉 分 子 基 础 研 究 的 优 良 材 料。 关 键 词 甘 蓝； 蜡 粉 缺 失 突 变 体； 农 艺 性 状； 超 微 结 构； 遗 传 规 律； 蜡 粉 基 因 中 图 分 类 号Ｓ６３５.３ 文 献 标 志 码Ａ 文 章 编 号１０００－２０３０２０１８０１－００５７－０７ Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆａｈｅａｒｔ-ｓｈａｐｅｄｇｌｏｓｓｙ ｃａｂｂａｇｅｍｕｔａｎｔｓ４１０Ｍ ＳＨＩＬｉｃｈａｏ １，２ ，ＺＥＮＧＡｉｓｏｎｇ ２ ，ＬＩＪｉａｙｉ ３ ，ＷＡＮＧＪｉｎｘｉａｎｇ １，２ ，ＳＯＮＧＬｉｘｉａｏ ２ ，ＹＡＮＪｉｙｏｎｇ ２∗ １.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００９５，Ｃｈｉｎａ；２.ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＶｅｇｅｔａｂｌｅＣｒｏｐｓ， ＪｉａｎｇｓｕＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ/ＪｉａｎｇｓｕＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌＣｒｏｐＧｅｎｅｔｉｃＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ， Ｎａｎｊｉｎｇ２１００１４，Ｃｈｉｎａ；３.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＣｈｉｎａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８３，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ[Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓ]Ｔｏｅｎｒｉｃｈｔｈｅｇｅｒｍｐｌａｓｍｒｅｓｏｕｒｃｅｓａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆｎｅｗｖａｒｉｅｔｉｅｓｗｉｔｈｄｅｓｉｒａｂｌｅｔｒａｉｔｓｏｆ ｃａｂｂａｇｅ，ａｈｅａｒｔ-ｓｈａｐｅｄｇｌｏｓｓｙｍｕｔａｎｔ４１０Ｍｏｆｃａｂｂａｇｅｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ.[Ｍｅｔｈｏｄｓ]Ｔｈｅｍａｊｏｒｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓａｎｄｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆ４１０Ｍｐｌａｎｔｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ，ａｎｄｔｈｅｗａｘａｍｏｕｎｔａｎｄｃｒｙｓｔａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｓｃａｎｎｉｎｇｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏ- ｇｒａｐｈｓＳＥＭ.Ｔｈｅｎ，ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅｏｆｇｌｏｓｓｙｗａｘ-ｌｅｓｓｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ，Ｆ １ ，Ｆ ２ ，ＢＣ １ Ｐ １ ａｎｄＢＣ １ Ｐ ２ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈｃｒｏｓｓｉｎｇ，ｓｅｌｆｉｎｇａｎｄｂａｃｋ-ｃｒｏｓｓｉｎｇｂｙ４１０Ｍｍｕｔａｎｔａｎｄ４１０Ｗｗｉｌｄｐｌａｎｔｓ.Ｌａｓｔｌｙ，ｔｈｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｐｒｏｆｉｌｅｓｏｆ１４ｇｅｎｅｓ ｔｈａｔｗｅｒｅｒｅｌａｔｅｄｔｏｗａｘｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙｒｅａｌ-ｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＲＴ-ＰＣＲ.[Ｒｅｓｕｌｔｓ]４１０Ｍ ｐｌａｎｔｓｈａｄａｒｅｍａｒｋａｂｌｅｇｌｏｓｓｙｓｕｒｆａｃｅｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｔｒａｉｔｔｈｒｏｕｇｈｏｕｔｔｈｅｉｒｇｒｏｗｔｈａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ａｎｄｏｔｈｅｒｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓｗｅｒｅｉｎｄｉｓｔｉｎ- ｇｕｉｓｈａｂｌｅｆｒｏｍｔｈｏｓｅｏｆ４１０Ｗ.Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｈｅｍａｊｏｒｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ， ｃｒｕｄｅｆｉｂｅｒ，ｔｏｔａｌｓｕｇａｒａｎｄｄｒｙｍａｔｔｅｒｂｅｔｗｅｅｎ４１０Ｍａｎｄ４１０ＷｅｘｃｅｐｔｖｉｔａｍｉｎＣｃｏｎｔｅｎｔ.ＴｈｅＳＥＭａｎａｌｙｓｉｓｒｅｖｅａｌｅｄａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｔｏｔａｌｗａｘａｍｏｕｎｔｂｅｔｗｅｅｎ４１０Ｍａｎｄ４１０Ｗｐｌａｎｔｓ，ａｎｄｔｈｅｓｕｒｆａｃｅｏｆｍａｔｕｒｅｌｅａｖｅｓｏｆ４１０Ｗｗａｓｃｏｖｅｒｅｄｂｙｄｅｎｓｅ ｌｉｎｅａｒｏｒｃｏｌｕｍｎａｒｗａｘｃｒｙｓｔａｌｓｏｎｂｏｔｈｔｈｅｖｅｎｔｒａｌａｎｄａｂａｘｉａｌｏｆｔｈｅｌｅａｆｂｌａｄｅ.Ｃｏｎｖｅｒｓｅｌｙ，ｔｈｅｍａｔｕｒｅｌｅａｖｅｓｕｒｆａｃｅｏｆ４１０Ｍｗａｓ ａｌｍｏｓｔｄｅｖｏｉｄｏｆｗａｘｃｒｙｓｔａｌｓ，ｗｉｔｈｏｎｌｙａｓｍａｌｌｐｏｒｔｉｏｎｏｆｇｒａｎｕｌｅ-ｌｉｋｅｗａｘｃｒｙｓｔａｌｓｐｒｅｓｅｎｔｏｎｔｈｅｓｍｏｏｔｈｗａｘｆｉｌｍ.Ｔｈｅｎ，ｔｈｅＦ １ｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｎｏｎ-ｇｌｏｓｓｙｌｅａｖｅｓｗｅｒｅｄｏｍｉｎａｎｔｏｖｅｒｇｌｏｓｓｙｌｅａｖｅｓ.Ｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｒａｔｉｏｏｆ３ｎｏｎ-ｇｌｏｓｓｙｔｏ１ｇｌｏｓｓｙｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｉｎＦ ２ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ，ａｎｄｔｈｅｂａｃｋ-ｃｒｏｓｓｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｉｎｖｏｌｖｉｎｇａｇｌｏｓｓｙｐａｒｅｎｔａｓｔｈｅｒｅｃｕｒｒｅｎｔｐａｒｅｎｔｓｈｏｗｅｄａｒａｔｉｏｏｆ１ｎｏｎ-ｇｌｏｓｓｙｔｏ１ｇｌｏｓｓｙ. Ｓｏ，ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆ χ ２ ｔｅｓｔｏｎｔｈｅｓｅｐａｒａｔｅｄｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｐｒｏｖｅｄｔｈａｔｔｈｅｔｒａｉｔｏｆｇｌｏｓｓｙｗａｘ-ｌｅｓｓｗａｓｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｂｙｏｎｅｐａｉｒｏｆｒｅｃｅｓｓｉｖｅ ｇｅｎｅ.Ｌａｓｔｌｙ，ｏｕｒｗｏｒｋａｌｓｏｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｓｏｍｅｇｅｎｅｓｔｈａｔｗｅｒｅｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｗａｘｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄｅｘｐｏｒｔｐａｔｈｗａｙｓｗｅｒｅｄｏｗｎ-ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｉｎ４１０Ｍ，ｗｈｉｃｈｃｏｕｌｄｃａｕｓｅｔｈｅｇｌｏｓｓｙｐｈｅｎｏｔｙｐｅｏｆｍｕｔａｎｔｐｌａｎｔｓ.[Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ]４１０Ｍｅｘｈｉｂｉｔｅｄｅｘｃｅｌｌｅｎｔｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｗｉｔｈｒｅｍａｒｋａｂｌｅａｎｄｓｔａｂｌｅｇｌｏｓｓｙｐｈｅｎｏｔｙｐｅ，ａｎｄｂｅｌｏｎｇｓｔｏａｃｏｒｅｈｅａｒｔ-ｓｈａｐｅｄｐａｒｅｎｔｆｏｒｆｕｔｕｒｅｃａｂｂａｇｅｂｒｅｅｄｉｎｇｐｒｏｇｒａｍｓａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒｓｔｕｄｉｅｓ. Ｋｅｙｗｏｒｄｓｃａｂｂａｇｅ；ｇｌｏｓｓｙｍｕｔａｎｔ；ａｇｒｏｎｏｍｉｃｔｒａｉｔ；ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ；ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ；ｗａｘｇｅｎｅｓ 南 京 农 业 大 学 学 报 第４１ 卷 结 球 甘 蓝ＢｒａｓｓｉｃａｏｌｅｒａｃａＬ.ｖａｒ.ｃａｐｉｔａｔａ 简 称 甘 蓝， 是 十 字 花 科 芸 薹 属 甘 蓝 种 中 的 一 个 变 种。 其 叶 色 绿 至 深 绿， 外 叶 及 外 层 球 叶 表 面 均 有 一 层 蜡 粉 覆 盖。 蜡 粉 的 主 要 作 用 是 减 少 非 气 孔 的 水 分 散 失， 降 低 水 分 消 耗 [１] ， 保 护 植 物 抵 御 过 量 紫 外 线 辐 射、 低 温 冻 伤 等 逆 境 [２－３] ， 还 可 有 效 抵 御 细 菌 和 真 菌 病 原 体 的 入 侵， 防 止 食 草 昆 虫 的 侵 害 等 [４－５] 。 同 时， 甘 蓝 植 株 表 面 的 蜡 粉 多 少 还 是 决 定 商 品 品 质 的 一 个 重 要 指 标。 蜡 粉 少 的 甘 蓝 叶 色 亮 绿， 感 官 好， 品 质 优 良， 受 到 消 费 者 欢 迎。 亮 叶 甘 蓝 由 普 通 甘 蓝 突 变 而 来， 体 表 无 或 有 少 量 蜡 粉 覆 盖， 叶 色 亮 绿， 品 质 优 良， 对 于 丰 富 甘 蓝 种 质 资 源、 培 育 优 质 甘 蓝 新 品 种 具 有 重 要 的 意 义 [６] 。 关 于 无 蜡 粉 缺 失 突 变 体 甘 蓝 的 相 关 研 究， 在 国 内、 外 仅 有 少 量 报 道 [６－８] ， 而 且 发 现 的 均 是 圆 球 和 扁 球 型 突 变 体。 在 我 国 长 江 流 域 及 以 南 地 区， 牛 心 尖 球 类 型 甘 蓝 一 直 是 大 家 喜 欢 种 植 和 消 费 的 品 种 类 型。 牛 心 甘 蓝 普 遍 存 在 蜡 粉 较 多、 球 色 不 够 绿 的 问 题。 为 了 提 高 特 色 新 品 种 的 竞 争 优 势， 牛 心 甘 蓝 叶 色 的 改 良 成 为 育 种 工 作 者 的 一 个 重 要 课 题。２０１３ 年， 在 优 良 牛 心 型 纯 合 材 料４１０Ｗ 的 群 体 中， 发 现 了 其 蜡 粉 缺 失 突 变 体 ４１０Ｍ。 前 人 的 研 究 结 果 表 明， 芸 薹 属 植 物 突 变 体 缺 失 蜡 粉 性 状 遗 传 规 律 较 为 复 杂， 不 同 突 变 体 之 间 差 异 较 大， 且 由 不 同 的 基 因 控 制。 因 此， 本 文 对 首 次 发 现 的 牛 心 类 型 甘 蓝 突 变 体４１０Ｍ 的 特 征、 主 要 营 养 物 质 含 量、 蜡 粉 结 构、 遗 传 规 律 进 行 研 究， 并 且 对 拟 南 芥 中 参 与 蜡 粉 合 成、 转 运 的 基 因 在４１０Ｍ 和４１０Ｗ 中 进 行 了 表 达 水 平 分 析， 以 期 明 确 该 甘 蓝 蜡 粉 缺 失 突 变 体 的 特 征 特 性 及 其 在 育 种 中 的 实 际 应 用 价 值， 为 丰 富 甘 蓝 种 质 资 源、 新 品 种 创 制 和 改 良 提 供 理 论 依 据。 １ 材 料 与 方 法 １.１ 材 料 供 试 甘 蓝 野 生 型 材 料４１０Ｗ 及 其 蜡 粉 缺 失 突 变 体４１０Ｍ 由 江 苏 省 农 业 科 学 院 蔬 菜 研 究 所 叶 菜 类 蔬 菜 研 究 室 提 供。 供 试 材 料 分 别 于２０１５ 年７ 月 和２０１６ 年７ 月 中 旬 播 种，８ 月 中 旬 定 植 于 江 苏 省 农 业 科 学 院 六 合 实 验 基 地，８ 至１２ 月 进 行 田 间 取 样 和 田 间 性 状 调 查；１２ 月 上 旬 每 份 材 料 各 选 取４ 株 移 栽 于 大 棚， 翌 年 ３ 至５ 月 进 行 授 粉 留 种。 １.２ 农 艺 性 状 观 察 于 叶 球 成 熟 期 对 熟 性、 叶 色、 株 高、 开 展 度、 外 叶 数、 球 形、 单 球 质 量、 球 径、 中 心 柱 等 农 艺 性 状 按 常 规 方 法 进 行 调 查。 １.３ 营 养 品 质 测 定 于 叶 球 成 熟 期， 分 别 选 取 大 小 相 近、 成 熟 度 一 致、 无 病 害、 无 创 伤 的 球 叶 和 外 叶， 对 其 主 要 营 养 成 分 维 生 素Ｃ、 粗 纤 维、 总 糖、 干 物 质 含 量 按 常 规 方 法 进 行 测 定。 每 重 复 取３ 株 叶 球 及 相 应 外 叶，３ 次 重 复。 １.４ 蜡 粉 的 扫 描 电 镜 观 察 于 叶 球 成 熟 期， 取 各 材 料 的 外 叶， 避 开 叶 脉 用 直 径１０ｍｍ 打 孔 器 进 行 取 样， 然 后 将 样 品 置 于５０℃ 烘 箱 中 干 燥１２ｈ。 烘 干 后， 用 银 胶 固 定 在 样 品 台 上， 喷 金， 置 于 扫 描 电 子 显 微 镜 下 观 察。 １.５ ＲＮＡ 的 提 取 及 实 时 荧 光 定 量ＰＣＲＲＴ-ｑＰＣＲ 测 定 于 叶 球 成 熟 期， 取 各 材 料 的 外 叶， 采 用Ｔｒｉｚｏｌ 试 剂 盒 北 京 百 泰 克 生 物 技 术 有 限 公 司 分 别 提 取 野 生 型 和 突 变 体 材 料 总ＲＮＡ， 提 取 方 法 参 照 试 剂 盒 说 明 书。 按 照ＲＴ-ｑＰＣＲ 要 求 将ＲＮＡ 反 转 录 成ｃＤＮＡ， 根 据 中 国 农 业 科 学 院 网 站ｈｔｔｐ//ｏｃｒｉ-ｅｎｏｍｉｃｓ.ｏｒｇ/ｂｏｌｂａｓｅ/ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ.ｈｔｍ 公 布 的 甘 蓝 基 因 序 列， 利 用 拟 南 芥 各 个 基 因 序 列 进 行 比 对， 选 择 同 源 性 较 高 的 保 守 序 列， 使 用ＰｒｉｍｅｒＰｒｅｍｉｅｒ５.０ 软 件 设 计ＲＴ-ｑＰＣＲ 引 物 表１， 以 甘 蓝 的ａｃｔｉｎ 基 因 作 为 内 参 基 因。 所 用 染 料 为ＳＹＢＲＴａＫａＲａ， 配 制２０μＬ 的 体 系ＳＹＢＲ ＰｒｅｍｉｘＥｘＴａｑ２１０μＬ、 正 向 引 物１０μｍｏｌＬ －１ ０.８μＬ、 反 向 引 物１０μｍｏｌＬ －１ ０.８μＬ、 模 板ｃＤＮＡ １μＬ， 加ｄｄＨ ２ Ｏ 至２０μＬ。 采 用 两 步 法 荧 光 定 量ＰＣＲ 进 行 扩 增。 扩 增 程 序９５℃ ３０ｓ， 循 环１ 次；９５℃ ５ｓ，６０℃２０ｓ， 循 环４０ 次，７２℃ 单 点 检 测 信 号。 熔 解 程 序９５℃０ｓ，６５℃１５ｓ，９５℃０ｓ， 连 续 检 测 信 号。 每 个 样 品 重 复３ 次。 采 用２ －ΔΔＣ Ｔ 法 对 数 据 进 行 相 对 定 量 分 析。 １.６ 数 据 处 理 所 得 数 据 采 用ＳＡＳ８.１ 软 件 进 行 差 异 显 著 性 分 析， 在０.０５ 水 平 上 进 行 邓 肯 氏 多 重 比 较。 ８ ５ 第１ 期 石 利 朝， 等 牛 心 甘 蓝 蜡 粉 缺 失 突 变 体４１０Ｍ 特 征 的 研 究 表１ 用 于 实 时 荧 光 定 量ＰＣＲ 的 引 物 Ｔａｂｌｅ１ ＰｒｉｍｅｒｓｏｆｃａｂｂａｇｅｇｅｎｅｓｆｏｒＲＴ-ｑＰＣＲａｎａｌｙｓｉｓ 基 因 Ｇｅｎｅ 甘 蓝 基 因 组 序 列 编 号 ＣａｂｂａｇｅｇｅｎｏｍｅａｃｃｅｓｓｉｏｎＮｏ. 拟 南 芥 中 蛋 白 家 族 名 称 ＰｒｏｔｅｉｎｆａｍｉｌｙｎａｍｅｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ 引 物 对 序 列５′→３′ Ｐｒｉｍｅｒｐａｉｒｓｓｅｑｕｅｎｃｅ ＢｏｌＥＣＲ１０ Ｂｏｌ０４４３４８ 反 式 烯 脂 酰－ＣｏＡ 还 原 酶 ｔｒａｎｓ-２，３-ｅｎｏｙｌ-ｃｏｅｎｚｙｍｅＡｒｅｄｕｃｔａｓｅ ＡＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＡＧＧＧＴＡＴＣＡ/ ＧＣＧＡＴＧＴＴＧＡＡＣＣＣＴＡＧＣＣＡ ＢｏｌＦＡＴＢ Ｂｏｌ０２１０８１ 酰 基ＡＣＰ 硫 酯 酶 Ｆａｔｔｙａｃｙｌ-ＡＣＰｔｈｉｏｅｓｔｅｒａｓｅＢ ＡＣＴＧＧＡＧＡＡＡＴＴＴＴＡＡＣＡＡＧＡＧＣＡ/ ＣＴＣＧＧＣＡＡＧＧＡＴＡＧＧＧＴＣＡＧ ＢｏｌＫＣＲ１ Ｂｏｌ０１０４７４ β－ 酮 酰－ＣｏＡ 还 原 酶 β-ｋｅｔｏａｃｙｌ-ｃｏｅｎｚｙｍｅＡｒｅｄｕｃｔａｓｅ ＡＡＣＡＡＣＧＣＴＧＧＧＧＴＴＴＣＧＴＡ/ ＣＣＡＡＣＡＣＡＧＣＣＴＧＡＧＴＡＡＣＣＴ ＢｏｌＣＥＲ２ Ｂｏｌ０３７６６１ ＢＡＨＤ 酰 基 转 移 酶 ＢＡＨＤａｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ ＡＡＧＴＣＧＡＡＧＧＧＴＴＣＡＣＧＧＴＣ/ ＧＧＣＣＣＡＡＣＴＴＡＧＣＣＣＴＡＣＴＧ ＢｏｌＬＣＡＳ１ Ｂｏｌ００２５９０ 长 链 酰 基－ＣｏＡ 合 成 酶 Ｌｏｎｇｃｈａｉｎａｃｙｌ-ＣｏＡｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ ＡＡＧＧＧＣＴＴＣＴＴＧＡＧＣＣＡＧＡＣ/ ＴＡＧＧＣＧＧＧＧＴＡＧＴＣＴＣＴＴＣＣ ＢｏｌＫＣＳ１ Ｂｏｌ０１８４４７ β－ 酮 酰－ＣｏＡ 合 成 酶 β-ｋｅｔｏａｃｙｌ-ｃｏｅｎｚｙｍｅＡｓｙｎｔｈａｓｅ ＣＣＧＴＴＡＴＡＣＧＡＡＴＣＣＧＧＣＧＡ/ ＧＧＡＧＡＡＧＧＴＣＴＣＧＡＡＣＧＴＣＡ ＢｏｌＡＣＢＰ１ Ｂｏｌ０１７１８８ 酰 基－ＣｏＡ 结 合 蛋 白 Ａｃｙｌ-ＣｏＡｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ ＴＧＧＴＡＴＣＡＣＣＴＣＧＣＴＣＡＧＴＣＴ/ ＴＧＣＧＧＴＧＧＴＡＧＴＣＧＴＴＣＴＣＣ ＢｏｌＧＮＬ１ Ｂｏｌ０１２１６２ 囊 泡 转 运 Ｖｅｓｉｃｌｅｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ ＴＧＧＡＧＧＡＧＡＣＧＡＡＧＣＣＡＴＴＡＴ/ ＴＴＧＣＡＧＡＧＡＣＴＣＡＧＣＴＴＧＧＡ ＢｏｌＣＥＲ５ Ｂｏｌ０３１５９３ ＡＢＣ 转 运 器 ＡＢＣｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ ＡＴＧＧＡＧＴＴＧＧＡＣＡＧＴＧＣＧＡＧ/ ＡＧＴＣＣＡＴＣＧＡＧＣＡＡＣＣＴＴＣＧ ＢｏｌＬＴＰＧ１ Ｂｏｌ００２０９９ ＧＰＩ 锚 定 脂 质 转 移 蛋 白 ＧＰＩ-ａｎｃｈｏｒｅｄｌｉｐｉｄｔｒａｎｓｆｅｒｐｒｏｔｅｉｎ ＣＡＡＣＴＴＣＣＡＡＣＧＧＣＴＴＧＴＣＡＧ/ ＣＣＧＧＴＧＴＴＡＴＴＧＴＴＧＴＧＧＣＡ ＢｏｌＭＹＢ３０ Ｂｏｌ０３２２８９ Ｒ２Ｒ３ 类ＭＹＢ 转 录 因 子 Ｒ２Ｒ３-ｔｙｐｅＭＹＢ ＧＧＡＡＧＡＴＧＧＡＧＣＡＣＴＧＴＴＧＣ/ ＣＣＧＧＧＡＴＣＴＴＴＴＧＴＴＡＣＣＣＣＡ ＢｏｌＤＥＷＡＸ Ｂｏｌ００７７８７ ＡＰ２-ＥＲＦ 类 基 因 ＡＰ２-ＥＲＦ-ｔｙｐｅｇｅｎｅ ＴＧＣＡＡＧＣＣＡＡＧＡＴＣＡＣＣＡＣＣ/ ＡＧＡＧＡＣＣＧＧＡＡＣＧＧＡＴＡＧＧＴ ＢｏｌＤＣＬ４ Ｂｏｌ０３５８２７ ＴＣＧＧＣＡＴＴＣＡＧＴＴＣＴＧＧＡＧＴ/ ＣＧＣＣＡＡＣＴＴＴＡＧＴＧＧＣＡＡＣＣ ＢｏｌＨＵＢ１ Ｂｏｌ０３０１４１ ＴＧＧＴＴＣＴＡＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧ/ ＣＧＡＧＣＡＧＡＴＡＣＴＧＧＡＴＧＡＧＧＡ ２ 结 果 与 分 析 ２.１ 突 变 体４１０Ｍ 与 野 生 型４１０Ｗ 的 特 征 特 性 由 图１ 可 见 突 变 体４１０Ｍ 与 野 生 型４１０Ｗ 表 型 相 比， 除 了 蜡 粉 缺 失 性 状 外， 其 他 表 型 均 无 明 显 差 异。 图１ 野 生 型４１０Ｗ 和 突 变 体４１０Ｍ 表 型 Ｆｉｇ.１ Ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｗｉｌｄｔｙｐｅ４１０Ｗａｎｄｍｕｔａｎｔ４１０Ｍ Ａ. 幼 苗 期；Ｂ. 结 球 期；Ｃ. 生 殖 生 长 期 花 序。 Ａ.Ｓｅｅｄｌｉｎｇｓｔａｇｅ；Ｂ.Ｈｅａｄｉｎｇｓｔａｇｅ；Ｃ.Ｉｎｆｌｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓａｔｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｇｒｏｗｔｈｓｔａｇｅ. 对２ 个 材 料 整 个 生 育 期 的 特 征 特 性 进 行 观 察 发 现， 从 苗 期、 营 养 生 长 结 球 期 至 生 殖 生 长 期， 其 蜡 粉 缺 失 性 状 均 保 持 稳 定； 而 且， 突 变 体４１０Ｍ 连 续 自 交２ 代 后， 未 出 现 蜡 粉 性 状 分 离 现 象， 说 明 其 蜡 粉 缺 失 性 状 为 纯 合 性 状。 对２ 个 材 料 营 养 生 长 结 球 成 熟 期 的 农 艺 性 状 调 查 结 果 显 示， 突 变 体４１０Ｍ 与 野 生 型４１０Ｗ 成 熟 期 定 植 到 叶 球 成 熟 的 时 间 均 为６５ｄ 左 右， 株 高、 开 展 度、 外 叶 数、 球 形、 单 球 质 量、 球 径、 中 心 柱 长 等 农 艺 性 状 指 标 均 无 显 著 差 异 表２。 ４１０Ｗ 球 叶 和 外 叶 的 维 生 素Ｃ 含 量 分 别 为０.４８ 和０.６８ｍｇｇ －１ ， 而４１０Ｍ ９ ５ 南 京 农 业 大 学 学 报 第４１ 卷 球 叶 和 外 叶 的 维 生 素Ｃ 含 量 分 别 为０.５４ 和０.７８ｍｇｇ －１ ，４１０Ｍ 维 生 素Ｃ 含 量 较４１０Ｗ 有 显 著 提 高。 而 在 粗 蛋 白、 粗 纤 维、 总 糖、 干 物 质 成 分 含 量 方 面， 二 者 无 明 显 差 异 表３。 表２ ４１０Ｗ 和４１０Ｍ 农 艺 性 状 调 查 Ｔａｂｌｅ２ Ｓｕｒｖｅｙｏｆａｇｒｏｎｏｍｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆ４１０Ｗａｎｄ４１０Ｍ 材 料 Ｍａｔｅｒｉａｌ 株 高/ｃｍ Ｐｌａｎｔｈｅｉｇｈｔ 开 展 度/ｃｍ Ｐｌａｎｔｂｒｅａｄｔｈ 外 叶 数 Ｏｕｔｅｒ ｌｅａｆＮｏ. 球 形 Ｈｅａｄ ｓｈａｐｅ 叶 色 Ｌｅａｆ ｃｏｌｏｒ 单 球 质 量/ｋｇ Ｈｅａｄｗｅｉｇｈｔ 叶 球 纵 径/ｃｍ Ｈｅａｄｌｅｎｇｔｈ 叶 球 横 径/ｃｍ Ｈｅａｄｗｉｄｔｈ 中 心 柱 长/ｃｍ Ｃｏｒｅｌｅｎｇｔｈ 中 心 柱 长/ 球 高 Ｃｏｒｅｌｅｎｇｔｈ/ ｈｅａｄｈｅｉｇｈｔ ４１０Ｗ ２８.８３１.２４ ａ ４４.８７１.２０ ａ ９０.５０ ａ 尖 Ｈｅａｒｔ- ｓｈａｐｅｄ 绿 Ｇｒｅｅｎ ０.５２０.０２ ａ ２０.１１１.４３ ａ １２.６８１.２４ ａ ９.０３０.４６ ａ ０.４５０.０１ ａ ４１０Ｍ ２８.１２１.４５ ａ ４３.５００.４８ ａ ９０.５０ ａ 尖 Ｈｅａｒｔ- ｓｈａｐｅｄ 亮 绿 Ｇｌｏｓｓｙ- ｇｒｅｅｎ ０.５３０.０２ ａ ２０.０６０.４６ ａ １２.５６０.３０ ａ ９.０２０.３８ ａ ０.４５０.０２ ａ注 同 列 数 据 后 不 同 小 写 字 母 表 示 差 异 显 著Ｐ０.０５。 下 同。 ＮｏｔｅＴｈｅｄａｔａｗｉｔｈｉｎａｃｏｌｕｍｎｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｍａｌｌｌｅｔｔｅｒｓｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｔ０.０５ｌｅｖｅｌ.Ｔｈｅｓａｍｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ. 表３ ４１０Ｗ 和４１０Ｍ 主 要 营 养 成 分 含 量 Ｔａｂｌｅ３ Ｔｈｅｍａｊｏｒｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆ４１０Ｗａｎｄ４１０Ｍ ｍｇｇ －１ 叶 片 Ｌｅａｆ 材 料 Ｍａｔｅｒｉａｌ 维 生 素Ｃ ＶｉｔａｍｉｎＣ 粗 蛋 白 Ｃｒｕｄｅｐｒｏｔｅｉｎ 粗 纤 维 Ｃｒｕｄｅｆｉｂｅｒ 总 糖 Ｔｏｔａｌｓｕｇａｒ 干 物 质 Ｄｒｙｍａｔｔｅｒ 球 叶Ｈｅａｄｌｅａｆ ４１０Ｗ ０.４８０.０３ ｄ １４.７０.１２ ｂ ５.９０.０７ ｂ ３９.５０.１８ ａ ８１.２０.２４ ｂ ４１０Ｍ ０.５４０.０２ ｃ １４.６０.０７ ｂ ５.４０.０８ ｂ ４０.２０.１１ ａ ８０.１０.３６ ｂ 外 叶Ｏｕｔｅｒｌｅａｆ ４１０Ｗ ０.６８０.０１ ｂ １７.６０.１０ ａ ８.７０.０５ ａ ２８.６０.０８ ｂ １０５.６０.９２ ａ ４１０Ｍ ０.７５０.０５ ａ １８.８０.０８ ａ ８.４０.０４ ａ ２９.４０.２４ ｂ ９９.２０.３８ ａ２.２ 蜡 粉 性 状 扫 描 电 镜 观 察 扫 描 电 镜 观 察 图２ 表 明， 野 生 型 和 突 变 体 蜡 粉 覆 盖 度 差 异 显 著， 与 牟 香 丽 等 [７] 、 唐 俊 等 [８] 的 研 究 结 果 一 致。 在５００ 倍 视 野 下， 野 生 型 甘 蓝 叶 片 背 面、 腹 面 均 覆 盖 有 较 多 的 蜡 粉， 且 分 布 致 密； 在５０００ 倍 视 野 下， 可 观 察 到 其 蜡 粉 结 构 为 片 状 和 线 状。 而 突 变 体 叶 面 光 滑， 叶 背 面 和 腹 面 均 几 乎 无 蜡 粉 覆 盖， 只 有 零 星 颗 粒 状 结 构。 图２ 野 生 型 和 突 变 体 叶 片 腹 面 和 背 面 微 观 结 构 观 察 Ｆｉｇ.２ Ｍｉｃｒｏｓｔｒｕｒｅｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆｌｅａｆｂｌａｄｅｖｅｎｔｒａｌａｎｄｌｅａｆｂｌａｄｅａｂａｘｉａｌｏｆｗｉｌｄ-ｔｙｐｅａｎｄｍｕｔａｎｔＡ. 突 变 体 叶 片 腹 面５００；Ｂ. 野 生 型 叶 片 腹 面５００；Ｃ. 野 生 型 叶 片 腹 面５０００；Ｄ. 突 变 体 叶 片 背 面５００；Ｅ. 野 生 型 叶 片 背 面５００；Ｆ. 野 生 型 叶 片 背 面５０００。 Ａ.Ｌｅａｆｖｅｎｔｒａｌｓｕｒｆａｃｅｏｆｍｕｔａｎｔ５００；Ｂ.Ｌｅａｆｖｅｎｔｒａｌｓｕｒｆａｃｅｏｆｗｉｌｄｔｙｐｅ５００；Ｃ.Ｌｅａｆｖｅｎｔｒａｌｓｕｒｆａｃｅｏｆｗｉｌｄｔｙｐｅ５０００；Ｄ.Ｌｅａｆ ａｂｘｉａｌｓｕｒｆａｃｅｏｆｍｕｔａｎｔ５００；Ｅ.Ｌｅａｆａｂｘｉａｌｓｕｒｆａｃｅｏｆｗｉｌｄｔｙｐｅ５００；Ｆ.Ｌｅａｆａｂｘｉａｌｓｕｒｆａｃｅｏｆｗｉｌｄｔｙｐｅ５０００. ０ ６ 第１ 期 石 利 朝， 等 牛 心 甘 蓝 蜡 粉 缺 失 突 变 体４１０Ｍ 特 征 的 研 究 ２.３ 蜡 粉 缺 失 性 状 遗 传 规 律 分 析 以４１０Ｍ 和４１０Ｗ 为 亲 本 构 建６ 世 代 群 体， 正 交 与 反 交Ｆ １ 群 体１９２ 株 单 株 全 部 表 现 为 叶 面 有 蜡 粉； Ｆ ２ 群 体 有 蜡 粉 的 植 株５３２ 株， 蜡 粉 缺 失 的 植 株１５５ 株， 分 离 比 例 为３.４３∶１， 经 χ ２ 测 验 符 合３∶１ χ ２ ＝１.９５７ χ ２ ０.０５ ＝３.８４１ 的 分 离 比 例； 以 有 蜡 粉 的４１０Ｗ 为 回 交 亲 本 获 得 的 回 交 群 体 中，２０８ 株 单 株 全 部 表 现 为 叶 面 有 蜡 粉； 而 与 蜡 粉 缺 失 亲 本４１０Ｍ 回 交 获 得 的 回 交 群 体 中， 有 蜡 粉 的 植 株１５８ 株， 蜡 粉 缺 失 的 植 株１３６ 株， 分 离 比 例 为１.１６∶１， 经 χ ２ 测 验 符 合１∶１ χ ２ ＝１.５００ χ ２ ０.０５ ＝３.８４１ 的 分 离 比 例 表４。 表 明４１０Ｍ 的 蜡 粉 缺 失 性 状 由 隐 性 单 基 因 控 制。 表４ ６ 世 代 材 料 性 状 田 间 调 查 及 χ ２ 测 验 Ｔａｂｌｅ４ Ｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｔｉｃｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅｏｆｇｌｏｓｓｙｗａｘ-ｌｅｓｓｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄ χ ２ ｔｅｓｔ 世 代 Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ 总 株 数 Ｎｏ.ｏｆｐｌａｎｔｓ 有 蜡 粉 单 株 数 Ｎｏ.ｏｆｗａｘｐｌａｎｔｓ 无 蜡 粉 亮 绿 单 株 数 Ｎｏ.ｏｆｇｌｏｓｓｙｐｌａｎｔｓ 有 蜡 粉∶ 无 蜡 粉 亮 绿 Ｗａｘｐｌａｎｔｓ∶ｇｌｏｓｓｙｐｌａｎｔｓ χ ２ χ ２ ０.０５ Ｐ １ ４１０Ｗ １００ １００ ０ Ｐ ２ ４１０Ｍ ９４ ０ ９４ Ｆ １ ４１０Ｗ４１０Ｍ １００ １００ ０ Ｆ １ ４１０Ｍ４１０Ｗ ９２ ９２ ０ Ｆ ２ ６８７ ５３２ １５５ ３.４３∶１ １.９５７ ３.８４１ ＢＣ １ Ｐ １ ２０８ ２０８ ０ ＢＣ １ Ｐ ２ ２９４ １５８ １３６ １.１６∶１ １.５００ ３.８４１ ２.４ 蜡 粉 合 成、 转 运 基 因 的ＲＴ-ｑＰＣＲ 分 析 图３ ４１０Ｗ 和４１０Ｍ 相 关 蜡 质 合 成、 转 运 基 因 的 表 达 模 式 分 析 Ｆｉｇ.３ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｇｅｎｅｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎ ｗａｘｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｐｏｒｔｏｆ４１０Ｗａｎｄ４１０Ｍ 筛 选 出１４ 个 在 拟 南 芥 中 参 与 蜡 粉 合 成、 转 运 的 基 因， 对 其 在 野 生 型 和 突 变 体 中 的 表 达 进 行 实 时 荧 光 定 量 分 析。 其 中 ＥＣＲ１０、ＦＡＴＢ、ＫＣＲ１、 ＣＥＲ２、ＬＣＡＳ１ 和ＫＣＳ１ 为 参 与 表 皮 蜡 质 生 物 合 成 的 基 因，ＡＣＢＰ１、ＧＮＬ１、ＣＥＲ５、ＬＴＰＧ１ 为 参 与 蜡 质 传 输 的 基 因，ＭＹＢ３０、ＤＥＷＡＸ、ＤＣＬ４、ＨＵＢ１ 为 参 与 蜡 质 合 成 和 传 输 的 调 控 基 因。 在 这１４ 个 基 因 中，４１０Ｍ 中ＣＥＲ２、ＬＣＡＳ１、ＡＣＢＰ１、ＣＥＲ５、ＨＵＢ１ 的 表 达 高 于 其 野 生 型，ＫＣＲ１、ＬＴＰＧ１ 在２ 个 材 料 中 表 达 差 异 不 显 著， 其 余７ 个 基 因 均 为４１０Ｗ 高 于４１０Ｍ， 而 且 均 差 异 显 著。 ３ 讨 论 扁 球 类 型 和 圆 球 类 型 的 蜡 粉 缺 失 突 变 体 均 有 报 道 [６－８] ， 牛 心 类 型 的 蜡 粉 缺 失 突 变 体 为 首 次 报 道。 前 人 研 究 表 明， 蜡 粉 缺 失 突 变 体 营 养 生 长 期 生 长 滞 后， 生 长 势 小 于 野 生 型； 而 且， 蜡 粉 缺 失 材 料 结 种 能 力 减 弱， 不 易 结 籽。 但 本 研 究 中 的 牛 心 突 变 体４１０Ｍ， 在 营 养 生 长 期 与 生 殖 生 长 期， 除 了 蜡 粉 缺 失 性 状 外， 在 生 长 势 和 结 种 能 力 方 面 与 野 生 型 均 无 明 显 差 异， 表 明 蜡 粉 缺 失 对 植 株 生 长 发 育 方 面 产 生 的 影 响 大 小 与 不 同 突 变 体 材 料 有 关。 在 品 质 测 定 中， 突 变 体４１０Ｍ 球 叶 和 外 叶 的 维 生 素Ｃ 含 量 高 于 野 生 型。 研 究 表 明 大 部 分 植 物 中 的ＡｓＡ 维 生 素Ｃ 含 量 与 抗 逆 性 呈 正 相 关， 可 通 过 提 高ＡｓＡ 含 量 或 促 进 氧 化 态 的ＡｓＡ 还 原 来 提 高 植 物 的 抗 逆 性 [９] 。 植 物 表 面 覆 盖 的 蜡 粉 可 抵 御 外 界 逆 境、 病 虫 害 等 伤 害， 而 蜡 粉 的 缺 失 使 得 植 物 对 外 部 各 种 逆 境 承 受 力 减 弱， 猜 测 植 物 会 应 激 性 调 动 自 身 的 防 御 系 统， 比 如 提 高ＡｓＡ 含 量 来 增 强 对 逆 境 的 抵 御。 至 于 蜡 粉 缺 失 是 否 与 甘 蓝ＡｓＡ 含 量 的 变 化 之 间 存 在 某 种 相 关 性， 还 需 进 一 步 深 入 研 究。 国 内 外 关 于 芸 薹 属 蜡 粉 缺 失 性 状 的 研 究 多 有 报 道。 芸 薹 属 作 物 的 蜡 粉 缺 失 性 状 遗 传 规 律 较 为 复 杂， 不 同 突 变 体 之 间 存 在 多 样 性， 且 由 不 同 的 基 因 控 制， 其 中 大 多 数 突 变 体 蜡 粉 缺 失 性 状 受 单 个 基 因 控 制， 其 中 以 单 基 因 隐 性 遗 传 最 为 常 见 [１０－１１] ， 显 性 遗 传 和 不 完 全 显 性 遗 传 较 少 [１２－１３] ； 少 数 突 变 体 受 双 基 因 控 制 [１４] 。 在 甘 蓝 蜡 粉 缺 失 突 变 体 中， 初 莲 香 等 [６] 在 甘 蓝 品 种‘ 迎 春’ 中 发 现 了 一 株 蜡 粉 缺 失 突 变 体， 对 其 遗 传 效 应 分 析 表 明， 这 一 蜡 粉 缺 失 性 状 是 由 一 对 隐 性 纯 合 基 因 控 制 [１５] 。 李 景 涛 [１６] 对２ 份 圆 球 蜡 粉 缺 失 突 变 体１０Ｑ-９６１ 和ＬＤ１０ 的 遗 传 规 律 进 行 分 析， 结 果 表 明 这２ 份 突 变 体 蜡 粉 缺 失 性 状 均 为 隐 性 单 基 因 遗 传， 但 其 无 蜡 粉 亮 绿 基 因 位 于 不 同 的 遗 传 位 点。 其 后 该 研 究 团 队 又 报 道 了 受 单 基 因 显 性 控 制 的 无 蜡 粉 材 料 １ ６ 南 京 农 业 大 学 学 报 第４１ 卷 １０Ｑ-９７４ 的 发 现 [８] 。 本 试 验 中， 突 变 体４１０Ｍ 配 制 的６ 世 代 群 体 的 分 离 比 例 符 合 单 基 因 隐 性 遗 传 的 分 离 比 例。 植 物 外 表 皮 蜡 粉 成